southern blot 阳性对照有条带，转基因的没有

如题所述

举报该问题

推荐答案 2017-04-23

一、Southern印迹杂交(Southern blot)是一9漆5年由英国人southern创建，是研究DNA图谱的基本技术，在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。二、基本原理 Southern印迹杂交是先将DNA样品(含不同大小的DNA片段)先按片段长短进

温馨提示：答案为网友推荐，仅供参考

当前网址：http://88.wendadaohang.com/zd/SgBKtgKtSMgtcStccg.html

相似回答

southern dot blot测拷贝数基因组杂交不上的原因答：还是需要先确认一下阳性对照杂交是否成功，如果阳性对照有，基因组没有，就需要考虑：探针的特异性（确认没有污染的情况下，是否能从基因组模板中扩增出探针条带）基因组模板的质量（是否需要重新制备）但是如果阳性对照也没有，考虑的因素就多了，除了上述的两条，还需要再检查每一步的反应条件，变性，...

求助Western Blot实验条带没出现的原因分析及解决办法答：5.被测样品中不含有目的蛋白质或者目的蛋白质含量太低 5. 设置阳性对照。确定标本中是否含有目的蛋白质；增加样品的上样量。6. 溶液中有辣根过氧化物酶的抑制剂 6.用透析和超滤除去所用溶液中如叠氮化钠之类的抑制剂 7.抗体活力降低 7.在抗体活力保存时间内使用抗体；工作液现用现配 ...

...Southern的结果能否代替Southern blot的结果答：不能代替的，PCR-southern虽然可以排除PCR结果中的假阳性，但是不能确定基因整合的拷贝数。至于拷贝数的确定，可以用southern和Q-RT-PCR，一般建议做southern，Q-RT-PCR涉及到基因的表达问题，因为整合并不等于表达，希望对你有所帮助。

western blot 中,为什么显影后x光片是蓝色的,而且上边没有任何条带答：Western blot中，没有曝光的X光片都是蓝色的，除非曝光才会变成白色的。你可以从盒子里剪一点出来试试，一会就变白了。至于没有条带这个原因就多了，如果是有加阳性对照的样品（内参）也没条带，那么有可能是一抗抗性有问题，也有可能是压片时间不太够，或者是转膜没有转成功等等。

western blot实验怎么上样答：上样就是maker—阳性对照—阴性对照—检测样(N个)，如果检测样比较多，可以在检测样后再加上一个阴性对照和阳性对照。上样量一般5-20微升(样品与上样buffer混合后)，可以先做个普通的染色，看看条带有没有溢出，如果溢出了就上少点，太浅就上多点。都调整好了再继续做转印。

western blot中分泌物检测到细胞抽提物检测不到怎么回事答：有二种可能性:1.你的细胞裂解和抽提过程可能出了问题,你的蛋白是分泌蛋白,所以在信号肽被切掉前(蛋白分泌出细胞前)是嵌入在膜上,如果你使用的抽提液不够强的话,胞内蛋白可能没有溶出,而是在细胞碎片上,没有加入到WB膜上. 你的阳性对照可能本来是个胞内蛋白,所以没有问题,建议选用一个膜蛋白或...

northern blot 实验为什么要做内参对照答：内参通常选择18s rRNA，28s rRNA，或者U6 SnRNA，一方面起阳性对照的作用，另一方面这些内参基因表达量比较均一。你在比较不同样本的目的带是否有区别是，可以用内参的带作为对照。举例来说，你用qPCR得到如下结果：某种miRNA的表达量在肿瘤组织和癌旁组织中有差异；当你用northern进行验证时，如果两种组织...

转基因动物的转移方法答：巴宾耐特(Babinet)发现虽然转基因小鼠产生HBsAg,但在6个月内没有任何病理变化,表现为一种持续的带病毒状态。这些结果表明:乙型肝炎患者的肝细胞损伤不是由HBV的HBsAg表达直接引起,而是通过对肝细胞膜上的病毒抗原发生免疫反应造成的。因此,可以用转基因小鼠模型来研究免疫耐受与肝细胞损伤的关系以探讨发病机制。此外,转...

大家正在搜

southern blot的步骤 westernblot条带上标 southernblot转膜 southernblot的作用 northern blot步骤 western blot的应用 northern blot western blot 原理 southernblot常见问题

southern blot 鉴定拷贝数需要阳性对照吗，用转基...

对转基因植物的检测来说，PCR-Southern的结果能否代...

southern blot条带怎么读

southern杂交出现的条带大小是探针的长度吗

谁能详细地说一下southern blot的的原理和有什么应...

southern blot验证细菌基因敲除，怎样设计探针

救命啊PCR总是没有任何条带，请问原因