å©ç¨å¤ç§ååæ è®°ææ¯å¯ä»¥å®ä½ä¸æ¤ç©æç
æåè²æå
³çåºå ï¼ç¶åå¯ä»¥å°åºå å
éåºæ¥ä¹å转å
¥å¯¹ç
§æ¤ç©ï¼å¯ä»¥æé«æ¤ç©æç
æéæä¿è¿åè²ã
以ååæ è®°ææ¯å¨å°éº¦æ¡éç
æç
è²ç§ä¸çè¿ç¨ä¸ºä¾ã
ååæ è®°
å¨åä¸åºç¡ä¸åºç¨ç 究é¢åï¼ååæ è®°ææ¯å·²å¼å§åºç¨äºä½ç©ç§è´¨èµæºåè²ç§çç 究ï¼ç¹å«æ¯å¨æ建ååéä¼ å¾è°±åæ è®°ç®çæ§ç¶åºå æ¹é¢åå¾äºå¾å¤§çè¿å±ã
ååæ è®°ä¸å½¢ææ è®°ãç»èæ è®°ãçåæ è®°ç¸æ¯è¾ï¼æ以ä¸å æ¹é¢çä¼ç¹:â å¨æ¤ç©ä½çå¤ä¸ªç»ç»åçè²é¶æ®µåå¯æ£æµå°ï¼ä¸åæ¶ç©ºéå¶ãâ¡æ°éå¤ï¼éåæ´ä¸ª
åºå ç»ãâ¢æ许å¤æ 记表ç°ä¸ºå
±æ¾æ§ï¼è½å¤é´å«åºå å纯åä¸å¦ï¼æä¾å®æ´çåºå åãå¨æ è®°å°éº¦æå¶éç
åºå æ¹é¢ï¼ååæ è®°å¯ä»¥å¨æ´æ·±å±æ¬¡ä¸æ示å°éº¦æééä¼ æºå¶ãéè¿æ¾å°ä¸æéåºå ç´§å¯è¿éçååæ è®°ï¼ä¸ä½è½å¨éä¼ èæ¯ä¸åçè²ç§ææä¸
ç¹å¼æ§çæ£æµç®çåºå ï¼èä¸å¯ä»¥å¨ä»»ä¸çè²é¶æ®µåæ¶å¯¹å¤ä¸ªææ§åºå è¿è¡çéï¼è¿ä¸ºäºè§£ææºåæç
åç§ä¸æå«æçææ§åºå æä¾äºæ´ä¸ºè¿
éã稳å®ãå¯é çæ¹æ³ã
ç®åï¼ç¨äºæ è®°å°éº¦æå¶éç
åºå çååæ 记主è¦æ以ä¸å ç§:
2.l RFLPææ¯å¨å°éº¦æå¶éç
åºå æ è®°ä¸çåºç¨
RFLP(restriction fragment length polymorphism)ä½ä¸ºéä¼ åæçå·¥å
·å¼å§äº1974å¹´ï¼80年代å¼å§åºç¨äºæ¤ç©ãå
¶åºæ¬åçæ¯ç©ç§çåºå ç»DNAå¨
éå¶æ§å
åé
¶çä½ç¨ä¸ï¼äº§çç¸å½å¤çã大å°ä¸ççDNAç段ï¼ç¨æ¾å°æ§åä½ç´ æ è®°çDNAåæ¢éæä¸è¢«æ è®°DNAç¸å
³çç段æ£æµåºæ¥ï¼ä»èæ建åºå¤ææ§å¾è°±;å®æ代表çæ¯åºå ç» DNAå¨éå¶æ§å
åé
¶æ¶åå产ççç段å¨é¿åº¦ä¸çå·®å¼ãRFLPææ¯è¢«å¹¿æ³åºç¨äºå°éº¦éä¼ å¾è°±çæ建æ è®°åå®ä½å°éº¦çç®çåºå ã
å¨å°éº¦æå¶éç
åºå çRFLPæ è®°æ¹é¢ï¼SCHACHERMAYRç[8]å°ä¸ç¼ç åä½èç½æ¿é
¶çLrkl0åºå ç3.9KbçHindâ
¢çæ®µç¨ Pstâ
åæå
个äºç段ï¼å°è¿äºäºç段ä½ä¸ºRFLPæ è®°ï¼å¯»æ¾å°äºç¹å¼çLrk10ç段å¯ä½ä¸ºä¸å°éº¦æå¶éç
åºå Lr10ç´§å¯è¿éçååæ è®°ï¼å°è¿ä¸äºç段ä¸å·²ç¥ææ§åºå çååºå ç³»è¿è¡Southernæ交ï¼åç°è¿ä¸3.9KbçHindâ
¢ç段ä»
åå¨äºæºå¸¦æå¶éç
åºå Lr10çè¿çåºå ç³»ä¸ãè¿ä¸æ¥å°æ¤ RFLPæ è®°Krkl0-6转å为STSæ è®°STSLrkl0ä¸6ï¼åç°ä¸282bpçç段ä»
åå¨äºæºå¸¦Lr10çåç§ä¸ï¼F2群ä½å离è¿ä¸æ¥è¯ææ¤ 282bpçç段ä¸Lr10ç´§å¯è¿éãSCHACHERMAYRç[9]å©ç¨è¿çåºå ç³»æ¾å°äºä¸æå¶éç
åºå Lr24ç´§å¯è¿éçRFLPåRAPDçæ è®°ãå¨ä¾è¯ç115个RFLPæ¢éä¸ï¼å
¶ä¸6个ä¸Lr24ç´§å¯è¿éï¼ä»360个éæºRAPD
å¼ç©ä¸ï¼æ¾å°äº11个è½å¤æ示å¤ææ§çå¼ç©ï¼å
¶ä¸ä¸ä¸ªä¸ Lr24ç´§å¯è¿éï¼å¹¶å°è¯¥RAPD产ç©å
éãæµåºå°å
¶è½¬å为æ´ä¸ºç¨³å®å¯é çSTSæ è®°ï¼ä¸ºååæ è®°è¾
å©è²ç§æä¸äºè¯å¥½çåºç¡ãFEUILLETç[10] å©ç¨å°éº¦æå¶éç
è¿çåºå ç³»Lr1/6*ThatcheråThatcheråæç
åç§Frisalï¼éè¿F2群ä½å离ï¼å°37个RFLPä¸ç16个å®ä½å¨äºç¬¬äºé¨ååæºç¾¤ï¼èä¸è½å¨Lr1/6*ThatcheråFrisalä¹é´æ示å¤ææ§ï¼I1个RFLPæ¢éè½å¨è¿çåºå ç³»é´æ示å¤ææ§ï¼F2群ä½å离åæåç°ï¼å
¶ä¸3个ä¸ææ§åºå è¿éï¼å
¶ä¸ä¸å®ä½å¨æè²ä½5Dä¸çæ¢épTAG621è¯æä¸Lr1ç´§å¯è¿éï¼å¹¶å°è¿ä¸RFLPæ 记转å为äºæ´ä¸ºå¯é çSTS æ è®°ã
AUTRIQUE[11]çå©ç¨4ç§å«ä¸åææ§åºå çå°éº¦è¿çåºå ç³»ï¼æ ¹æ®ææ§åºå å¨å
¶æè²ä½ä¸æå¤çä½ç½®éæ©å
éï¼åæ¶ï¼ä»å¤§éº¦çRFLPè¿éå¾è°±åDä¸åºå ç»RFLPå¾è°±ä¸ï¼æéäºå
¶å®çå
éãéè¿æ交çæ¹æ³æ¥å¯»æ¾å¤ææ§ååæ è®°ãç»æåç°ï¼å®ä½å¨æè²ä½7DLå3DLä¸ç8个ååæ è®°ï¼ä¸ææ§åºå Lr19åLr24å
±å离;æ¥èªAegilops umbellulataçLr9ï¼è¢«å®ä½å¨æè²ä½6Bä¸ï¼ä¸å
éXksuD27ä¸Lr9å
±å离ï¼ä»¥åä¸Lr32ç´§å¯è¿éç两个RFLPæ è®°ï¼éä¼ è·ç¦»åå«ä¸º(3.3å2.6)cMå(6.9å3.6)cMã
2.2 å°éº¦æå¶éç
åºå çRAPDæ è®°
NAIKç[12]å©ç¨å«Lr28çæå¶éç
è¿çåºå ç³»ï¼ä»80个éæºå¼ç©ä¸æ¾å°äºä¸ä¸ªè½å¨ä¾ä½äº²æ¬åè½®å亲æ¬ä¸æ示å¤ææ§çRAPDæ è®°OPJä¸ O1ãå°æ¤387bpçå¤ææ§äº§ç©å
éãæµåºï¼å°å
¶è®¾è®¡ææ´ä¸ºç¨³å®çSTSæ è®°ï¼å©ç¨BSAæ³ï¼å¯¹F3群ä½è¿è¡åæï¼åç°387bpçç¹å¼æ§äº§ç©åªåºç°å¨ææ§ç¾¤ä½ä¸ï¼èå¨æç
群ä½ä¸è¡¨ç°ç¼ºå¤±ãè¯æäºRAPDæ è®°OPJä¸O1åSTS æ è®°åä¸Lr28ç´§å¯è¿éãSIELDLERç[13]å©ç¨400个éæºå¼ç©å14个DNAæ¢éçéè¿çåºå ç³»Lr9çå¤ææ§ï¼å¹¶éè¿F2群ä½è¿è¡éä¼ è¿éåæãç»æ表æ2个RAPDæ è®°åä¸ä¸ªRFLPæ è®°å¯ä»¥åºåææåç³»,ä¸ä¸Lr9ç´§å¯è¿éãWILLIAMç[14]å©ç¨RAPDææ¯ï¼ä»400个éæºå¼ç©ä¸ï¼æ¾å°äº3个è½å¨æç
群ä½åæç
群ä½ä¸æ示å¤ææ§çå¼ç©0PG-05ã0P1-16åOPR-03ï¼å°å
¶å
é转åææ¢éåï¼å¯¹éç»ç¾¤ä½è¿è¡ Southernæ交ï¼ç¡®å®å
¶ä¸å两个æ¢éä¸æä¹
æå¶éç
åºå ç¸å
³çæ°éæ§ç¶ä½ç¹(QTL)ç´§å¯è¿éï¼å
¶ä¸å®ä½å¨7BLä¸çQTLä¸æå¶éç
åºå Lr34 é¨ååæºãSCHACHERMAYRç[15]ä»395个éæºå¼ç©ä¸çéåºäº3个ä¸å°éº¦æå¶éç
åºå Lr9è¿éçRAPDæ è®°ï¼å°å
¶ç¹å¼æ§äº§ç©å
éãæµåºï¼ç¶å转åææ´ä¸ºç¨³å®çSTSæ è®°ï¼F2ãF3å离群ä½æ£æµåç°ï¼ææç3个RAPDæ è®°0PA-07ã0PJ-l3ãOPR-15åä¸RFLPæ è®° cMWG684ä¸Lr9ç´§å¯è¿éãå¦ä¸RFLPæ è®°PSR546ä¹ä¸Lr9ç´§å¯è¿éï¼å¹¶ä¸ä¸è¿°å个
DNAæ è®°ç´§å¯è¿éï¼éä¼ è·ç¦»ä¸º(8士2.4)cMï¼æ¤æ 记被å®ä½å¨å°éº¦æè²ä½é¿è6BLä¸ãDEDRYVERç[16]å©ç¨å«Lr24çå°éº¦æå¶éç
è¿çåºå ç³»ï¼å¨125个éæºå¼ç©ä¸ï¼åªæå¼ç©OP-H5è½å¨æç
亲æ¬RL6064ä¸æ©
å¢åºä¸700bpçç¹å¼æ§çæ¡å¸¦ï¼èå¨æç
亲æ¬Thatcherä¸æ²¡æãF2群ä½å离è¯æï¼è¯¥æ è®°ä¸Lr24å®å
¨è¿éãå°å
¶è½¬åæ稳å®ãå¯é çSCARæ è®°ï¼ä¸ºååæ è®°è¾
å©è²ç§æä¾äºæåçå·¥å
·ã
3 å
¶å®ååæ è®°
è½ç¶RFLPåRAPDæ¯ä¸¤ç§æ¯è¾æ®éçååæ è®°ï¼ä½RFLPå¨å°éº¦ä¸æ£æµçå¤ææ§è¾ä½ï¼ä»
为20%--38%ãRAPDæ¯æ¹ä¾¿ç»æµçååæ è®°ï¼ä½æ¯
éå¤æ§å稳å®æ§è¾å·®ãå
¶å®çååæ è®°ï¼å¦SSRãISSRåAFLPç综åä¿¡æ¯é大ï¼å¨ä½ç©ç¹å«æ¯å°éº¦
éä¼ èµæºçç 究ä¸æç广éçåºç¨åæ¯ã
4 ååæ è®°è¾
å©éæ©
ç®åï¼ååæ è®°ææ¯å·²å¼å§åºç¨äºè²ç§å®è·µï¼å¹¶è¡¨ç°åºå
¶ç¬ç¹çä¼è¶æ§ã寻æ¾ä¸éè¦çåèºæ§ç¶ç´§å¯è¿éçååæ è®°ï¼æ¯è¿è¡ååæ è®°è¾
å©éæ©(å称ååè²ç§)åéè¿ä½å¾å
éåºå çåºç¡ãååæ è®°è¾
å©éæ©(Molecular-assisted-selectionç®ç§°MAS)æ¯çç©ææ¯ä¸ä¼ ç»éä¼ è²ç§ç¸ç»åèå½¢æçï¼å®å¯ä»¥åå°ä¼ ç»çå交è²ç§è¿ç¨ä¸å¾é¾æ¶é¤çè¿éç´¯èµï¼è¿å¯ä»¥æä¸åæå¶éç
åºå èåå°åä¸ä¼è¯åç§ä¸ï¼å®ç°åæåºå çç´¯å ä½ç¨ï¼è·å¾æä¹
ææ§ãå¨è·å¾ç¨³å®çååæ è®°çåºç¡ä¸ï¼éè¿æè²ä½æ¥è¡(Chromosome walking)çæ¹æ³å离å
é该åºå ã
ç±äºååæ è®°è²ç§ææ¯ç®åå°ä¸æçåå®åï¼å æ¤è¿ä¸è½ä½ä¸ºä¸ç§è²ç§æ¹æ³åç¬ä½¿ç¨ãæå½ä¼ ç»è²ç§ç»éªä¸°å¯ï¼å æ¤ï¼åºæ³¨æå°ååæ è®°è¿ä¸å
è¿ææ¯ä¸è²ç§å®¶ç丰å¯ç»éªç¸ç»åï¼ä½¿ååæ è®°è¾
å©éæ©åæ¥å
¶æ´å¤§çä½ç¨ã