蒂娜·菲与詹妮弗·麦克纳马拉（Jennifer McNamara）和亚当·伯恩斯坦一起为剧集选择演员，他们首先就决定由菲亲自扮演女主角丽兹·莱蒙。菲承认丽兹一角和她成为《周六夜现场》首席编剧的经历存在相似之处，特别是她工作的高负荷和关注度。菲请自己在《周六夜现场》的一位演员同事崔西·摩根（Tracy Morgan）饰演崔西·乔丹（Tracy Jordan），后果相信这个角色正是为他“量身定做的”，菲也指出剧中崔西·乔丹的“野性表演”和崔西·摩根在《周六夜现场》中的表现很相似。
菲为自己的朋友杰克·麦克布瑞尔（Jack McBrayer）创作了电视台那个天真的杂工肯尼斯·帕塞尔（Kenneth Parcell），麦克布瑞尔也被称赞为“这个节目最耀眼的发现”。菲表示自己“非常希望他出演那个角色，而且非常高兴没有人对此表示反对”。确定麦克布瑞尔出演后，亚历克·鲍德温获选出演主要负责东岸电视和微波炉编程部门的副总裁杰克·唐纳吉（Jack Donaghy），一个“完全不受审查”的专横人物。菲为亚历克·鲍德温量身定做了这个角色，所以“当他同意出演时非常惊喜”。《我为喜剧狂》的剧集进展就围绕着“菲出演的丽兹·莱蒙，《女生秀》忙个不停的首席编剧和亚历克·鲍德温诠释的电视台专横高管杰克·唐纳吉之间你来我往的关系”展开。
贾达·弗雷德兰德（Judah Friedlander）获选出演《女生秀》中的一位编剧弗兰克·罗斯塔诺（Frank Rossitano），参加试镜前他和菲从未见过面。他的角色是基于菲在《周六夜现场》中合作过的至少两位编剧为蓝本创作的，而且他也“无疑给角色带来了一些自己的特色”，比如他的角色总是戴着一顶卡车司机式的棒球帽。剧中丽兹的老友，《女生秀》制片人皮特·霍恩伯格（Pete Hornberger）是基于斯科特·安第斯（Scott Adsit）设计的，后者也同意扮演这个角色。前《周六夜现场》演员瑞秋·德拉彻原本获选在《我为喜剧狂》中扮演简娜·德卡罗（Jenna DeCarlo）一角，并且已经完成了试播集的拍摄，但这集最终没有播出。2006年8月，执行制片人洛恩·迈克尔斯宣布简娜一角将另选演员出演，但德拉彻还是会扮演另一个角色。在最后播出的这集试播集中，她以《女生秀》养猫人的身份出镜。同月晚些时候，全国广播公司宣布已由简·科拉克斯基取代德拉彻出演简娜一角，并且角色的名字也改为简娜·玛隆妮。迈克尔斯表示“大家都为她的加入感到激动不已”，并认为她将成为这个角色的“完美人选”。
除了以上7位主要演员外，这一季中还有多位其他演员的演出，包括扮演编剧图弗·斯帕洛克（Toofer Spurlock）的凯斯·鲍威尔（Keith Powell），饰演演员兼编剧乔什·吉拉德（Josh Girard）的朗尼·罗斯（Lonny Ross）以及出演丽兹小助理施乐·泽洛克斯（Cerie Xerox）一角的卡特里娜·宝登，这三位演员将在第2季中成为主要演员。此外还有扮演乔纳森（Jonathan）一角的马里克·潘考利（Maulik Pancholy），饰演达特·康·斯莱特里（Dot Com Slattery）的凯文·布朗（Kevin Brown）、出演格里兹·格里斯伍德（Grizz Griswold）的格里兹·查普曼（Grizz Chapman），诠释J·D·卢兹的约翰·卢兹（John Lutz）和扮演里奥·斯派西曼医生（Dr. Leo Spaceman）的克里斯·帕内尔（Chris Parnell）等。
