我的目的基因目前只知道部分序列，现在需要克隆出这个基因全长来，请问我该怎么做？

Question

我已经合成了RACE模板及引物，进行了PCR，但是不知道什么问题，一直没有出来目的条带

Answer 1

优化模板：

1.1提高细胞质量，RNA浓度；

1.2提高反转录的反应温度，42——>50度。

优化PCR过程：

2.1 减半引物量；

2.2尝试更低的退火温度，如50度。