siRNA 怎么用于动物实验

如题所述

Small interfering RNA (siRNA):种RNA(~21-25核苷酸),由Dicer(RNAase Ⅲ家族双链RNA具特异性酶)加工.SiRNAsiRISC主要员,激发与互补目标mRNA沉默.
RNA干涉(RNAinterference,RNAi)指内源性或外源性双链RNA(dsRNA)介导细胞内mRNA发特异性降解,导致靶基表达沉默,产相应功能表型缺失现象.
RNA干涉(RNAi)实验室种强实验工具,利用具同源性双链RNA(dsRNA)诱导序列特异目标基沉寂,迅速阻断基性.siRNARNA沉默通路起作用,特定信使RNA(mRNA)进行降解指导要素.siRNARNAi途径间产物,RNAi发挥效应所必需.siRNA形主要由DicerRde-1调控完.由于RNA 病毒入侵、转座转录、基组反向重复序列转录等原,细胞现dsRNA,Rde-1(RNAi缺陷基-1)编码蛋白质识别外源dsRNA,dsRNA达定量候,Rde-1引导dsRNA与Rde-1编码Dicer(Dicer种RNaseIII 性核酸内切酶,具四结构域:Argonaute家族PAZ结构域,III型RNA酶性区域,dsRNA结合区域及DEAH/DEXHRNA解旋酶性区)结合,形酶-dsRNA复合体.Dicer 切割形siRNA,,ATP参与,细胞存种RNA诱导沉默复合体RNA-induced silencing complex RNAi干涉关键步骤组装RISC合介导特异性反应siRNA蛋白.siRNA并入RISC,与靶标基编码区或UTR区完全配,降解靶标基,说siRNA降解与其序列互补配mRNA.其调控机制通互补配沉默相应靶位基表达,所种典型负调控机制.siRNA识别靶序列高度特异性,降解首先相于siRNA说央位置发,所些央碱基位点显极重要,旦发错配严重抑制RNAi效应.
RNAi基沉默(silent gene)面具高效性简单性,所基功能研究重要工具.
数药物属于标靶基(或疾病基)抑制剂,RNAi 模拟药物作用,功能丢失(LOF)研究比传统功能获(GOF)更具优势., RNAi 今制药产业药物靶标确认重要工具.同,些靶标实验证明效siRNA/shRNA本身进步发RNAi药物.
药物标靶发现确认面,RNAi技术已获广泛应用.物技术公司或制药公司通利用建立RNAi文库引入细胞,通观察细胞表型变化发现具功能基.通RNAi文库介导肿瘤细胞发现能抑制肿瘤基.旦所发现基属于用药靶标(表达蛋白细胞膜或泌细胞外),针靶标进行规模药物筛选.外,发现靶标用RNAi技术细胞水平或物体内进步确认.
疾病治疗面,双链RNA或siRNA已用于临床测试用于几种疾病治疗,视黄斑退化、肌肉萎缩性侧索硬化症、类风湿性关节炎、肥胖症等.抗病毒治疗面,帕金森病等神经系统疾病已经始初步采用RNA干扰疗.肿瘤治疗面已经取些.
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