一个基因工程方面的问题

Question

在基因工程中，科学家们总是将真核生物的基因插入原核生物的基因中，比如将人的胰岛素基因插入大肠杆菌的质粒中，然后通过发酵工程生产人的胰岛素。可我们生物书上说分泌蛋白需要经过核糖体和内质网还有高尔基体这三种细胞器共同作用才能完成，但在大肠杆菌的细胞中没有内质网和高尔基体，大肠杆菌是怎样分泌人的胰岛素的呢

Answer 1

大肠杆菌缺乏相关的翻译后加工系统，合成的人胰岛素没有活性。人工提取后，进行相关的人工处理后，才能使之具有活性。大肠杆菌属于原核生物，没有内质网，高尔基体等细胞器，大肠杆菌分泌出来的胰岛素需要进一步人工加工才能成为具有生物活性的胰岛素。

1978年美国的2个实验室合作，通过基因工程使E.coli合成了人胰岛素。在实验室中将人胰岛素基因A、B链的人工合成基因分别组合到E.coli的不同质粒上，然后再移至菌体内，着种重组质粒在E.coli细胞内进行正常的复制和表达，从而使带有A、B链基因的工程菌株分别产生人胰岛素A、B链，然后再用人工的方法，在体外通过二硫键使这2条链连接成有活性的人胰岛素。

随着科学技术的发展，现在科学家已经改为用酵母菌、昆虫培养细胞、或哺乳动物培养细胞等真核细胞作为表达载体，而少用大肠杆菌。

参考：
基因工程的应用：
http://www.ksgkyx.cn/gky/web/ztwz/kexue/kexue-2/zutiweb/zu25/010.htm
第一个基因工程药物——胰岛素：
http://www.gene123.cn/crack/AcquaintGene/2009-09-11/2363.html来自：求助得到的回答

Answer 2

利用大肠杆菌生产胰岛素的基因工程中，第一步，首先要从人的胰岛B细胞内提取出胰岛素的信使RNA，然后以它为模板合成出人的胰岛素DNA，也就是胰岛素基因
大肠杆菌的质粒能够在宿主细胞内独立复制且稳定保存；具有多个限制性内切酶的切点，以便和目的基因连接；具有某些标记基因，如抗四环素的抗药性标记基因，便于进行筛选和检测。
将重组质粒导入大肠杆菌细胞内，胰岛素基因就随着质粒的复制而复制，且如果成功表达，大肠杆菌就能合成出人的胰岛素

Answer 3

大肠杆菌成功表达外源基因后产生了大量胰岛素原（前体），人工处理后就是胰岛素了

Answer 4

转基因大肠杆菌内合成的是多肽链
要用人工提取在外让其形成一定的空间结构成为胰岛素

Answer 5

大肠杆菌分泌合成的是胰岛素前体，而后再人工提取出来进一步合成胰岛素