盐析主要破坏了蛋白质的什么

Question

如题所述

Answer 1

盐析使蛋白质沉淀析出，主要是破坏了蛋白质的（水化膜）。

盐析法沉淀蛋白质的原理是：由于向蛋白质溶液中加入了大量的盐，如硫酸铵、氯化钠等，因此使得蛋白质表面的电荷被中和，破坏了其表面的水化膜，于是达到蛋白质沉淀的效果。

盐析的原理

1、破坏了水化层 

在高浓度的中性盐溶液中，由于盐离子亲水性比蛋白质强，与蛋白质胶粒争夺与水结合，破坏了蛋白质的水化层。

在高浓度的中性盐溶液中，由于蛋白质和盐离子对溶液中水分子都有吸引力，产生与水化合现象，但它们之间有竞争作用，当大量中性盐加入时，使得盐解离产生的离子争夺了溶液中大部分自由水，从而破坏蛋白质的水化作用，引起蛋白质溶解度降低，故从溶液中沉淀出来。

2、破坏了电荷

由于盐是强电解质，解离作用强，盐的解离可抑制蛋白质弱电解质的解离，使蛋白质带电荷减少，更容易聚集析出。

蛋白质的组成及特点

蛋白质是由C（碳）、H（氢）、O（氧）、N（氮）组成，一般蛋白质可能还会含有P（磷）、S（硫）、Fe（铁）、Zn（锌）、Cu（铜）、B（硼）、Mn（锰）、I（碘）、Mo（钼）等。

这些元素在蛋白质中的组成百分比约为：碳50%、氢7%、氧23%、氮16%、硫0~3%、其他微量。

1、一切蛋白质都含氮元素，且各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16%；

2、蛋白质系数：任何生物样品中每1g元氮的存在，就表示大约有100/16=6.25g蛋白质的存在， 6.25常称为蛋白质常数。

Answer 2

盐析主要破坏了蛋白质的结构。

蛋白质是由氨基酸组成的长链状分子，在水溶液中会形成三维结构。添加盐或调节溶液的离子浓度会改变蛋白质的溶解度，并引起蛋白质的沉淀。这种沉淀作用破坏了蛋白质的结构，使其失去原有的生物功能。同时，盐析也可能导致蛋白质聚集成大颗粒，降低了蛋白质的活性和可溶性。

在进行蛋白质盐析实验时，应该注意以下方面

1、 pH值的选择

不同蛋白质对pH值的敏感度不同，选择合适的pH值对盐析效果至关重要。通常情况下，选择蛋白质的等电点附近的pH值能够最大程度地降低溶解度，促使蛋白质沉淀。

2、盐浓度的调节

盐浓度的选择对蛋白质盐析有很大影响。过高的盐浓度可能会使蛋白质失去溶解性，但同时也会增加可能的蛋白质聚集和失活的风险。因此，需要通过实验优化盐浓度。

3、温度的控制

温度可以对蛋白质沉淀和溶解过程产生影响。通常情况下，较低的温度有助于促进蛋白质的沉淀，较高的温度则有助于蛋白质的溶解。根据具体的实验需求，需要选择适当的温度条件。

4、混合和搅拌方法

混合溶液时应避免产生气泡，因为气泡可能破坏蛋白质结构。搅拌的方法和强度也需要控制，过强的搅拌有可能引起蛋白质的失活。

5、盐析后的沉淀回收

合理的离心条件可以提高沉淀的收集率。收集沉淀时最好使用冷离心和避光处理，减少氧化或降解的可能性。

6、保存条件

盐析得到的蛋白质沉淀应在适当的保存条件下储存，以防止降解、氧化或变质。

总之，在进行蛋白质盐析实验时，应综合考虑上述因素，并根据具体实验需求进行优化和控制。

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