做标准曲线首先有标准物质，然后有一个曲线的浓度范围。比如说，标准物质X，浓度是0.1mg/ml-2mg/ml。
配制样品的时候，取X适量，配制成浓度为10mg/ml的母液，然后逐级稀释，配制成浓度为0.1mg/ml，0.2mg/m，0.5mg/ml，1.0mg/ml，2.0mg/ml的样品，然后按照浓度由低到高的顺序进样分析。（由低到高是避免系统误差）
注意：这里是配制一份样品，稀释成若干线性用的样品。一般至少5个浓度。
然后可以在excel上形成散点图。然后添加趋势线，并且显示R2和公式。这个y=97.04x+0.0498就是这个线性公式，R2是相关系数，如下图所示：
扩展资料：
高效液相色谱法特点：
1、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。
2、高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。
3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
4、高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。
5、应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。
6、柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物
7、样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。
参考资料来源：百度百科-高效液相色谱
参考资料来源：高效液相色谱怡
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