A549细胞转染效率低

Question

现在用Lipo转染A549细胞出现了转染效率低的问题。我采用的质粒为EGFP质粒，protocol使用的是Lipo转染A549细胞（六孔板铺板为3×10^5/孔，每孔加入3300ng质粒）。用同一管质粒和转染试剂转染其他细胞转染效率可以达到80%，但是现在转染A549连10%都不到。我看到其他同学都能把A549转到50%以上。为什么我的转染效率这么差呢？

Answer 1

混和加入细胞中不含血清在转染过程中使用含有血清的培养基，细胞状态良好有利于转染效率的提高。转染体系中含有抑制物转染体系中不应包含抗生素、EDTA、柠檬酸、磷酸盐、RPMI、硫酸软骨素、透明质酸酶、硫酸葡萄糖聚酶及硫酸化蛋白聚糖。会不会是因为Lipo转质粒难度稍微大一点?我们实验室前段时间用合成公司购买的siRNA,RFect sRNATransfection Reagent转染了A549细胞，实验结果还算不错，转染效率接近80%。