我手头有个腺病毒载体，是缺失E1/E3及复制相关基因的 Ad5，仅保留了ITR和包装信号序列

Question

我手头有个腺病毒载体，是缺失E1/E3及复制相关基因的 Ad5，仅保留了ITR和包装信号序列。那我转染HEK293的时候，是不是需要有携带复制相关基因的一个质粒作为辅助，来跟这个质粒一起共转染HEK293细胞

Answer 1

第一代腺病毒载体：一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体，此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应，纯化后可以安全使用，体内表达周期可达4周。第二代腺病毒载体：E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体，产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性方面有所改进，但病毒包装难度和出毒和病毒滴度下降厉害，目前应用相当局限。第三代腺病毒载体：第三代载体缺失了全部的（无病毒载体，gutless vector）或大部分腺病毒基因（微型腺病毒载体，mini Ad），仅可保留ITR和包装信号序列。第三代腺病毒载体最大可插入35kb的基因，病毒蛋白表达引起的细胞免疫反应进一步减少，载体中引入核基质附着区基因可使得外源基因保持长期表达，并增加了载体的稳定性。这一载体系统需要一个腺病毒突变体作为辅助病毒。目前，第一代腺病毒载体仍是科研和临床应用最为广泛的腺病毒载体。一般常用Ad5型腺病毒。