做微生物实验的步骤

Question

如题所述

Answer 1

操作步骤
1．涂片将培养14—16小时的枯草芽孢杆菌和培养24小时的大肠杆菌分别作涂片（注意涂片切不可过于浓厚），干燥、固定。固定时通过火焰1—2次即可，不可过热，以载玻片不烫手为宜。
2．染色
（1）初染
加草酸铵结晶紫一滴，约一分钟，水洗。
（2）媒染
滴加碘液冲去残水，并覆盖约一分钟，水洗。
（3）脱色
将载玻片上面的水甩净，并衬以白背景，用95％酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止，约20—30秒钟，立即用水冲净酒精。
（4）复染
用番红液染1—2分钟，水洗。
（5）镜检
干燥后，置油镜观察。革兰氏阴性菌呈红色，革兰氏阳性菌呈紫色。以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准，过于密集的细菌，常常呈假阳性。
（6）同法在一载玻片上以大肠杆菌与枯草芽孢杆菌混合制片，作革兰氏染色对比。
革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度，如脱色过度，则阳性菌可被误染为阴性菌；而脱色不够时，阴性菌可被误染为阳性菌。此外，菌龄也影响染色结果，如阳性菌培养时间过长，或已死亡及部分菌自行溶解了，都常呈阴性反应。

Answer 2

1、准备工作，培养基的配制及灭菌（121-126度灭30分钟高压蒸汽式灭菌），玻璃器皿的灭菌（170度灭2小时干热灭菌，也可用湿热灭菌）若量大可加长灭菌时间。
2、微生物实验室及无菌操作台开紫外灯灭菌1小时，关闭后至少半小时才进入无菌室，我们一般1小时后才进去。因为紫外灯照射后有残留。
3、进入无菌室要穿戴专门的衣服，帽子，鞋子，口罩，手套。在接触无菌的东西都要用75%的酒精喷洒或涂抹，如果是药品就要求更严。
4、实验完后，把平皿倒置放入设定好温度的培养箱内，并在要的时间观察记录。
5、完后无菌室可以打开通风，不然里面的酒精味很难闻！
6、实验没有用完的样品扔了就行了！不过观察后有长菌的培养基最好烧开在倒，平皿最好煮一下。
参考资料来源：百度百科-微生物实验室