荧光发射发生在三重态。
在某一激发重态,各个激发态先振动弛豫到该激发,到最低能级后才发射荧光单重态或磷光三重态。磷光的产生是由第一激发单重态的最低振动能级,通过系间窜越至第一激发三重态,在经过振动弛豫,转至其最低振动能级而发散的,系间窜动是自旋禁阻的,因而其速率常数小得多。
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间接测定法
不管是直接测定,还是间接测定,一般的采用标准工作曲线法,取各种已知量的荧光物质,配成一系列的标准溶液,测定出这些标准溶液的荧光强度,然后给出荧光强度对标准溶液的浓度的工作曲线。在同样的仪器条件下,测定未知样品的荧光强度,然后从标准工作曲线上查出未知样品的浓度(即含量)。