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单克隆抗体制备的基本程序
杂交瘤
制备单克隆抗体
实验流程
答:
在杂交瘤技术中,
单克隆抗体的制备流程主要包括抗原的准备、动物免疫、细胞融合、筛选及克隆化、大量生产几个关键步骤
。以下是各步骤的具体操作要点。抗原制备是关键的第一步。确保抗原的纯度越高,制备单克隆抗体的成功率越高。抗原可以是蛋白、多肽、小分子等。选择合适的抗原种类和纯化程度,对后续实验的...
单克隆抗体的制备
步骤
答:
3、选择性培养 选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基;4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需
单克隆抗体的
阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增;5、单克隆抗体的大量
制备
单克隆抗体的大量制备一般采用动物体内诱生法和体外培养法。
单克隆抗体制备的基本
原理与过程?有什么意义
答:
单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法
。(1)体内诱生法 取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。
单克隆抗体的制备
步骤
答:
3、选择性培养:选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞
,一般采用HAT选择性培养基。4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化:在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。5、单克隆抗体的大量制备:...
单克隆抗体制备
过程
答:
单克隆抗体的制备过程分为几个关键步骤:首先,
进行免疫动物。选择6-8周龄雌性Balb/c小鼠,通过免疫注射,使用目的抗原刺激其产生致敏B淋巴细胞
。抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官,激活并增殖B淋巴细胞,形成致敏细胞。接着,进行细胞融合。小鼠经眼球摘除放血法处理后,无菌取出脾脏,与同系骨髓...
制备单克隆抗体的
过程
答:
(一)脾细胞 1.材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。 (2)1640培养液
单克隆抗体制备
流程 (3)2.5%FCS-1640营养液 2.操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。 (2)将小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在无菌条件下取脾。 (3)把脾放入5ml含有2...
单克隆抗体制备
详细步骤
答:
生产过程包括免疫小鼠、
制备
佐剂、免疫接种和血清效价检测。弗氏佐剂和水溶性佐剂被用于增强免疫反应,常用的实验材料有Balb/c雌鼠和SP2/0骨髓瘤细胞。免疫小鼠后,取脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合,形成具有稳定分泌特异性
抗体
能力的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的
克隆
化至关重要,通过有限稀释法筛选出遗传稳定且高...
单克隆抗体的制备
步骤
答:
过程 1)免疫脾细胞的制备
制备单克隆抗体的
动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。2)骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT的活性的细胞不能...
简述
单克隆抗体的制备
方案,流程应用和优点!(急,急,急!)
答:
1.向生物体内注射抗原,使其发生免疫反应。2.从血液中分离已免疫的效应B细胞。3.培养骨髓瘤细胞。4.把骨髓瘤细胞和效应B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞。5.筛选并培养杂交瘤细胞,产生
单克隆抗体
。优点:纯度高,特异性强,在疾病诊断上准确,高效,简易,快速。
单克隆抗体
答:
那么,
单克隆抗体制备
过程是怎样的?下面咱们就来详细看看吧。制备过程1. 免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB/c小鼠,按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官,刺激相应B淋巴细胞克隆,使其活化、...
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