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为什么PCR条带很亮
PCR
产物跑胶,
条带
亮度与DNA浓度还是总量有关?
答:
都相关,
如果你的产物浓度高的话,同样上样上1ul的产物,其总量当然高了。条带就亮了
。
条带亮度有时候还跟加进去的EB的量有关
,要是EB加的少的话,紫外灯下观察时,曝光时间要延长很长才能见到比较亮的条带。
pcr
产物200bp左右但是
条带亮
成一坨
答:
1 可能存在多个产物
2 条带亮成一坨可能是由于多个产物重叠在一起形成的,也可能是由于非特异性扩增产生的,也有可能是电泳条件不合适所导致的 3 在分析PCR产物时,可以尝试进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,以分离不同大小的DNA片段;同时也要注意扩增反应体系的优化和电泳条件的调整,避免非特异性扩增和电泳条件...
PCR
产物跑琼脂糖凝胶电泳,
条带
是这样的,是
什么
原因呢?求有经验者解答...
答:
如果你最下面的条带是100bp,
那么你的这个很亮的带就是引物二聚体,也就是你没有扩增出产物
如果需要设计定量PCR引物,可以在“引物库”中直接搜索,不用查找序列,设计引物,选择参数,确定引物等,输入基因名,直接提供引物序列,并进行非特异性检测 网页链接 ...
菌液
pcr
检测目的
条带很
明显但是有弱杂带是怎么回事
答:
简单来说是非特异性扩增
,一个PCR反反应体系的是有限的,大多数引物用于扩增目的基因,匹配度高,容易结合,因此扩增快,条带也就亮。而非特异扩增,匹配度不高,给合不稳定,因此扩出来的非特异带显得弱,而且通过有多条弱带产生。
为什么
有的时候能扩增出来,
条带很亮
,测序却测不出来?
答:
大概分析一下原因有:
PCR
产物纯化后是否成功回收回来了?回收产物是否用灭菌超纯水溶解?测序使用的引物是否扩增的引物?引物TM参数是否适合用来测序?如果是一批样品中出现个别 测序失败的,可以安排再次测序看看。
pcr
产物跑琼脂糖胶都是整条泳道亮,求如果改变pcr的条件可以pcr出单一...
答:
1、整条道都亮可能是因为你弥散了,属于没有P出足够的特异
条带
?2、当然如果你是RT-
PCR
就有可能是降解了···3、也可能是跑出去了,所以,缩短时间(看溴酚蓝跑到哪里了?)4、你做了PCR前跑胶了么?你确定有P前有东西?5、引物有问题么?会不会不特异 欢迎追问,求采纳 ...
PCR
产物电泳时,
为什么
有的
条带
不亮,有的
特别亮
呀?
答:
如果点样没有误差的话,那应该是
PCR
仪的问题了,半导体PCR仪用的时候长了,中间和四周温度有误差,温度控制不准,这个产物自然就不同了。可以让厂家给测试一下。或者换一下散热模块之类的。
特别
是国产的PCR仪,寿命就那么长。
PCR
跑胶,目的
条带很亮
,但是边沿不清楚,前后有拖尾现象,请教各位是什 ...
答:
4减少循环次数,减少非特异性扩增。5电泳缓冲液时间
太
长,ph值和盐离子浓度明显 改变。6电泳时电压不能太高,8V/cm。7一般来讲,基于promega和TaKaRa的
PCR
反应体系中,Mg和dNTP的浓度是相 匹配的,不需改动。8 加样量过大。过多的量会造成加样孔超载,从而导致拖尾和弥散,对于较大的DNA此现象更...
pcr
的
条带明亮
的白色是
什么
答:
1、在DNA电泳前,在需要电泳的DNA溶液里加上loadingbuffer,目的是在电泳时可以看到指示带,有两条:跑在前面的蓝色
条带
是溴酚蓝,位置大约相当于300bp的DNA,后面的绿色条带是二甲苯青FF,相当于4000bp左右大小DNA的位置。2、在制备琼脂糖胶时,需要加入EB,EB可以与DNA结合,在紫外灯下显示DNA位置...
pcr
产物
条带
的问题
答:
首先别以为步骤和你老师一样实际就一样了,加样的时候新手把试剂加多加少的事情很正常,比如加1微升的引物,操作不好的人仅仅粘附在枪头上的试剂就有两微升。EB温度控制不好就不要预先加,我都是跑完胶后再EB染色的,这样操作的时候也安全得多。胶的形状不好可能胶没有完全凝固,你倒完胶过个几个...
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