【5分钟讲透实验】如何把控HE染色过程中的种种问题

如题所述

第1个回答  2024-08-14
HE染色是组织切片常用的技术,用于显微镜下观察组织或细胞结构。以下是HE染色操作中应注意的关键点。
首先,组织必须充分固定,10%缓冲福尔马林是常用的选择。切片厚度需适中,一般4-5微米。染色前应调节pH值,避免组织酸化影响细胞核染色,需在自来水中冲洗或使用饱和碳酸锂水溶液处理。苏木精染色后,细胞核染色需清晰,细胞质应无色,分色时间不宜过长,否则染色过浅。
脱水过程需确保彻底,避免组织干燥导致的收缩与变形。二甲苯处理后如出现不透明状态,应重新脱水。切片周边应保持湿润,避免在染色过程中干燥。封片时使用中性树脂,选择合适的树脂浓度,避免气泡。洗涤步骤要充分,确保染色剂残留不会影响结果。
在染色过程中,需避免切片长时间暴露在空气中,保持实验室清洁。染色反应应密切监测,及时调整实验条件和步骤。常见问题包括染色异常,可能由于实验条件不佳或步骤执行错误引起。遇到问题时,需检查并调整实验条件和步骤,确保染色结果的质量和可靠性。