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载体抗性和筛选标记
载体抗性
基因有助于促进目的基因表达???
答:
抗性
基因只是一个
标记
,用于检测目的基因的表达与否,但质粒上带有的promotor可能有助于目的基因的表达
载体
构建的基本流程
答:
然后,对重组子进行
筛选与
鉴定。由于转化实验中会产生大量的非重组子和假阳性克隆,因此需要通过筛选和鉴定来获取真正的阳性克隆。常用的筛选方法包括抗生素
抗性筛选
、分子杂交筛选等。鉴定方法则包括PCR鉴定、酶切鉴定、测序鉴定等。最后,对重组
载体
进行扩增和纯化。一旦获得了阳性克隆,就需要对其进行扩增,...
质粒dna免疫小鼠
载体抗性
基因有哪些
答:
从而更方便地筛选出含有重组DNA分子的克隆。四环素
抗性
基因:四环素抗性基因也可以赋予宿主细胞对四环素的抗性,从而在筛选重组子时,通过添加四环素来淘汰非重组子,更方便地筛选出含有重组DNA分子的克隆。此外,四环素抗性基因也可以被用于
标记
基因,帮助鉴定
和筛选
含有重组DNA分子的细胞或个体。
用质粒
载体
进行外源 DNA 片段克隆,经抗生素
筛选
为何会出现假阳性?如何...
答:
质粒被切以后,和目的基因放在一个体系中,加入DNA连接酶,有可能质粒在切口处重新接上。这样的 质粒上面有
标记
基因,但没有目的基因。因此,这样的质粒导入受体细胞后也有
抗性
。这就是假阳性。还有一种假阳性,就是目的基因和质粒在连接时,方向接反了。如何防止假阳性,方法有三种。第一,用同尾酶去切...
如何构建
和筛选
基因工程细胞
答:
基因的运输工具——运
载体
要将一个外源基因,如上面所说的抗虫基因,送入受体细胞,如棉细胞,还需要有运输工具,这就是运载体。作为运载体的物质必须具备以下条件:能够在宿主细胞中复制并稳定地保存;具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接;具有某些
标记
基因,便于进行
筛选
。目前,符合上述条件并经常使用的运载体有质粒、...
什么是t
载体
答:
通过克隆甘露聚糖酶基因到pMD-18T
载体
构建了质粒pMD-18Tman2XcmI,克隆的甘露聚糖酶基因两侧各引进了一个特定的XcmI 酶切位点;用XcmI酶切质粒pMD-18Tman2XcmI可以制备T载体.因为甘露聚糖酶基因作为填充片段
和筛选标记
受半乳糖苷酶基因启动子的控制,甘露聚糖酶能够表达,从而水解甘露聚糖产生水解圈,指示...
筛选
含有目的基因的细胞、这句话什么意思?
答:
就是将含有目的基因的质粒(
载体
)感染细胞(一般为大肠杆菌),将感染成功的细胞
筛选
出来,通过细胞复制来扩增目的基因的数量。
为什么最常用的运
载体
是大肠杆菌的质粒呢?
答:
因为大肠杆菌的遗传背景清楚、各项优势明显。 像最常用的大肠杆菌质粒是pBR322质粒,因为其复制是松弛型(质粒能大量的复制),具有四环素和氨青霉素
抗性
基因
标记
(便于
筛选
),并具有一些便于应用的限制性核酸内切酶位点。
基因疫苗质粒
载体
的构建
答:
2 目的基因质粒的
载体
构建 基因疫苗大多采用质粒作载体。一般说来,基因疫苗质粒载体至少包括5个主要的部件:(1)细菌复制子,以便质粒DNA在细菌体内复制扩增,得到大量的拷贝,但不能在宿主细胞(真核细胞)中复制;(2)原核生物选择性
标记
基因,如抗生素
抗性
基因,以
筛选
含有质粒DNA的阳性细菌克隆(菌株...
人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素
抗性
基因,该抗性基因主 ...
答:
【答案】:B 作为运
载体
必须具备的条件:①要具有限制酶的切割位点,便于与外源基因连接;②要有
标记
基因(如
抗性
基因),以便于重组后重组子的
筛选
;③能在宿主细胞中稳定存在并复制;④是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来。受体细胞是长期自然选择地结果,能适应环境,一般不需要提高...
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