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质粒电泳没有条带
提
质粒
最后
电泳
拖尾什么原因
答:
第一有可能
质粒
的双链DNA破碎了,看来是你第一步重悬的过程对DNA造成一定程度的损害了,按说2000rpm,5min沉淀菌体,然后再加I液重悬,震荡1min就应该搞定的,顶多2min;第二种可能就是RNA
没有
除干净,拖尾的就是小分子的RNA片段,试着多加点RNA酶吧 ...
除了凝胶
电泳
,还有哪些方法可以检测
质粒
答:
谁说
质粒电泳
应该
条带
标准三条带候两
条质粒
同构象:超螺旋、环形、线形电泳速度
...的
质粒
测得OD260/OD280大于2!但琼脂糖
电泳
并
没有
RNA
条带
!
答:
额,琼脂糖
电泳有没有
什么差池,见过有个总失败的犯很低级的错误,琼脂糖没有用电极缓冲液配,而是用水配的...你自己查查看吧,细节步骤上有没有问题。
质粒
单酶切后
电泳
只有一条
条带
,位置比原质粒低一点,请问我这是切没切 ...
答:
肯定是切开了,如果
没有
切开,与原
质粒
的
条带
应该位置一样。最好是用DNA Marker作对照,单酶切后是线性分子,可以对照着marker来看是不是切开了。原质粒如果是新提取的是超螺旋的,但放的时间长的话,会形成开环或线性结构就不适合作对照了。
大肠杆菌转化后长得很慢,提
质粒
跑
电泳条带
很淡
答:
可能是转化效率低吧,或者虽然
质粒
转进去了,但生产的缺陷蛋白不能满足宿主细胞生长的需要,就长得慢了。
质粒
DNA跑
电泳
,跑了两次,发现两次
条带
整体不一样,不知道为什么,请高人...
答:
两次胶的浓度不太一样呗 融的程度也不一样 超螺旋 线性 开环的比例也不一样
我提的
质粒
在0.8%的琼脂糖
电泳
中,跑完后
条带
不清晰,不知道是什么原因...
答:
如果你的Marker跑出来
没有
问题,从上图看应该是你的
质粒
DNA浓度太高,最好质粒上样总量在500ng左右,不要超过1000ng。目标
条带
浓度过高容易造成拖带。最后,质粒由于是环状,超螺旋DNA和线性DNA的
电泳
速度不一样,所以电泳前一定要做酶切,把环状质粒切成线状;最好在质粒上有两个酶切位点,这样酶切...
质粒
单酶切出现两
条带
答:
~比如有两个单酶切位点可以产生:完整的
质粒
,单酶切的一个位点被切,两位点被切三种情况;这样的原则上会产生四种大小不同的
条带
!!酶切位点越多条带数应该越多才是!~~若是多位点的,可能会是
电泳
跑得不好,
没有
分出明显的条带!~~没做过质粒酶切电泳,仅是理论上分析的哈!!
为什么未酶切的
质粒
样品会出现2-3
条带
答:
质粒有
多种构象,超螺旋、环形、有时候会有线性,
电泳
速度不一样,所以会有两条或者三条
条带
。
若提取的
质粒电泳
为单一一条
条带
,如何判断其构型_百度问一问
答:
若提取的
质粒电泳
为单一一条
条带
,如何判断其构型【提问】查是否有明显的多重信号峰来判断,如果已知条带的可能序列,可以考虑割胶回收,然后酶切的方法初步判断是否该条带就是所需的产物。如果不知道序列,且条带长度较短(100-200bp),可以考虑使用基于DNA构象差异的电泳技术来区分,例如SSCP。如果长度...
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