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pcr双条带
为什么
pcr
中加入四种引物只能出现两个
条带
答:
数量较少导致无法被探测到。当
PCR
反应产生足够的浓度时,会出现两个主要的PCR产物,这两个产物对应于引物的两端,其他引物的PCR产物,由于其数量相对较少,无法在明亮的荧光强度的背景下被探测到,若加入四种引物,PCR反应产物大多会包含对应于最外侧引物的两个条带,故只能出现两个条带。
为什么测序结果有两个
条带
?
答:
通常是由于存在两条分子量很接近,采用琼脂糖电泳无法分开的
条带
,在测序时就会发生这种情况;样品中存在两个引物结合位点,这常常发生在样品中存在重复序列的情况下。当引物恰好设计在重复序列中时,那么在重复序列以外的部分就会出现Twopattern的情况;所用的测序引物不纯,这种情况一般发生在
PCR
产物测序中。
基因组DNA扩增
PCR
时为什么会出现两个
条带
答:
引物特异性不强,退火温度不适宜,琼脂糖胶配制有问题,上样buffer污染等
PCR
为什么需要2条引物
答:
PCR
就是聚合酶链式扩增反应,因为DNA是双链,扩增时就需要同时扩增两条链,需要设计上游和下游引物,同时扩增DNA双链因为引物通常是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与靶区域一端的一条DNA模板链互补; 另一个引物与靶区域另一端的另一条DNA模板链互补,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚...
pcr
产物第一次跑胶,有明显的一个
条带
。切胶回收后,将回收产物再次跑胶...
答:
应该是
两条
挨得很近的
条带
。可能是
pcr
回收产物有杂带污染,跑pcr产物的时候没有分开,然后回收纯化以后,再跑就分开了。这个酶切之后跑电泳也是两条带。双酶切的话,没关系的,照样回收照样连,照样出结果。
pcr
的
条带
明亮的白色是什么
答:
1、在DNA电泳前,在需要电泳的DNA溶液里加上loadingbuffer,目的是在电泳时可以看到指示带,有两条:跑在前面的蓝色
条带
是溴酚蓝,位置大约相当于300bp的DNA,后面的绿色条带是二甲苯青FF,相当于4000bp左右大小DNA的位置。2、在制备琼脂糖胶时,需要加入EB,EB可以与DNA结合,在紫外灯下显示DNA位置...
pcr
产物琼脂糖电泳怎么有三
条带
呢,有两个样还是四条带。而且用的2000...
答:
引物二聚体一个带,
PCR
产物可能有两个带(双螺旋或者链状的DNA跑的速度不一样)。模版和产物差距大的话还会有带。具体情况要具体分析。
最近在做
PCR
-RFLP,本来是两个
条带
的,却切成了三个条带,是不是酶切不...
答:
你好,首先你要确认这个里面确实没有发生酶切位点的变化(同你的与其相比)。另外,最下面往往有一条杂带,那个是干扰的,可以不用看。如果这些问题都不是,那基本上酶切不完全造成的,可以延长酶切时间或者摸索更好的酶切条件。
gapdh内参基因
pcr
后有几
条带
答:
看你引物设计了。人的GAPDH有12种已知剪切变体,在一般的细胞内能检出的有2-5种,所以某些引物可能会P出两条带来(剪切变体不同)。如果你是用做qPCR的定量,那就必须仔细设计引物以避开这些情况。
PCR
扩不出来,紧急求助
答:
我认为,“溴酚蓝带(约300bp)前后各有一
条带
,且两条带亮度差不多”,而“阴性对照(没加模板)只在溴酚蓝带后有一条带”。可以用实验组和阴性对照组比较,若两者溴酚蓝带后的带位置一直,那么应该是引物二聚体。 至于
PCR
,应从很多方面考虑,我有一个优化的方法: PCR必需具备下述基本条件:模板核酸(DNA或RNA)、...
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