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ecori是什么
三种限制性核酸内切酶
是什么
,以及读法,关键是读法。
答:
但是在读的时候,后面的I,
II
,III,就是罗马数字,按照one,tow three的方式去发音就好。前面和物种名相关的部分,能够拼起来的,就拼起来读,例如HindIII,可以念作[`hind θri:],XbaI ['eksba wʌn],BamHI [bem³ch wʌn],
EcoRI
[ikɔär wʌn]...
基因工程生产胰岛素使用的载体质粒,用
EcoRI
酶切割后产生的片段如图所示...
答:
A、根据切割形成的黏性末端可以判断,
EcoR
Ⅰ酶能够识别的序列为-G↓AATTC,A正确;B、图示看出,基因的两端均形成的相同的黏性末端,因此胰岛素基因的两侧都具有EcoRⅠ酶的作用位点,B正确;C、CaCl2处理大肠杆菌使细胞壁的通透性增加,可提高对重组质粒的吸收能力,C正确;D、使用DNA连接酶连接粘性末端为...
什么
为基因工程的发展起了推动作用?
答:
迄今发现的限制酶有400种,基因工程中常用的
EcoRI
、BamHll、Hindlll、Hinclv、Pstl、Pvull等十分钟。Ⅱ型限制酶是一种位点特异性酶,能够识别双链DNA分子中的特异序列,并在特定部位上水解双链DNA中每一条链上的磷酸二酯键,从而造成双链缺口,切断DNA分子。限制酶的识别序列一般为4~8个核苷酸,这...
基因工程中重组质粒怎么形成
答:
同时,也正是由于具有MCS序列,可以使具两种不同粘性末端(如
EcoRI
和BamHI的外源DN***段,无需借助其它操作而直接克隆到pUC质粒载体上。3. pGEM系列载体pGEM系列载体是一种与pUC系列十分类似的小分子的质粒载体。在其总长度为2 743bp的基因组DNA中,编码有一个氨苄青霉素抗性基因和一个lacZ'基因。在后者还插入了一...
什么
是MSAP??
答:
甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplification polymorphism,MSAP)技术由Reyna-lópez 等报道,并被用于检测双相型真菌的DNA甲基化,它是在扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism, AFLP)技术的基础上建立起来的。相关信息:提取高质量基因组DNA,分别用
EcoRI
/Hpa
II
,EcoRI/MspI ...
真核原核表达系统的优缺点?
答:
如果将DNA片段插入
EcoRI
切点,不会影响两个抗生素基因的表达。但是如果将DNA片段插入到Hind
II
I、Bam H I 或 Sal I切点,就会使抗四环素基因失活。这时,含有DNA插入片段的pBR322将使宿主细菌抗氨苄青霉素,但对四环素敏感。没有DNA插入片段的pBR322会使宿主细菌既抗氨苄青霉素又抗四环素,而没有pBR322质粒的细菌将对...
遗传工程的定义
答:
1972年在旧金山H.W.Boyer实验室首先发现的
EcoRI
核酸内切限制酶具有特别重要的意义。1967年在世界上有5个实验室几乎同时发现了DNA连接酶。1970年当时在Wisconsin大学的H.G.Khorana实验室的一个小组,发现T4DNA连接酶具有更高的连接活性,有时甚至能催化完全分离的两段DNA分子进行末端的连接。到了1972年底,人们已经掌握...
我要做基因的真核表达,用的酶是将XhoI 和
EcoRI
联用,怎么看酶切之后会...
答:
如果是目的基因里面没有XhoI 和
EcoRI的
酶切位点,引物设计好了,应该不会出现移码的问题。
用
EcorI
和SalI酶切目的基因和载体后酶连,然后转化DH5a,涂板后却不...
答:
用这两个酶没问题,你要确定几件事:1 目的基因和载体都切开了吗?特别是目的基因如果是PCR后直接酶切效率会较低;载体上两个酶切位点连在一起吗?2 感受态的效率问题 3 转化过程对不对,如抗生素加的对不对
双酶切老是切不完全
答:
首先,你看你的载体片段和目标片段的亮度比是不是大约10倍(因为一般T载体大小在2.5K~3k左右),如果是的话,那是正常现象。如果你能看见线性化的载体或没有切开的载体,那么建议你换一下新开封的酶试试。
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