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293T用PEI转染
包病毒的
293t
可以检测敲低吗
答:
可以。方法如下:
293T
密度约50%左右,
使用PEI转染
,收集48和72h病毒上清,用PEG8000浓缩病毒液,浓缩的方法是1个10cm的dish用300ul的DPBS溶解病毒颗粒,分装成6管,相当于一管=一个6孔的病毒量,然后用40、20、10、5ul的shA病毒浓缩液来感染细胞,24小时后传代,换成正常培养基,感染后48至72小时...
293T
细胞哪种
转染
试剂好
答:
Lipofectamine
转染
试剂可以将 siRNA 快速、转染到多种细胞类型中,并且具有较高的效率。目前也常被用于将 siUch-L1 从 Ambion 传递到HEK-
293
细胞,在哺乳动物细胞中导入Accell siRNA 等寡核苷酸也会用到该转染介质。国外有科研团队也在尝试使用 RNAiMax将FlexiTube 和 SMARTpool siRNA 转染到 HUVEC 细...
293T
细胞为什么经常用于
转染
,蛋白质表达
答:
经改造后在其中插入了T抗原,因此用
293T
细胞做
转染
可以获得较高的表达水平。293T细胞也可以作为普通的哺乳细胞用于筛选稳定表达的细胞系,不过它贴壁性差,容易脱落,不利于筛选。3T3细胞是小鼠胚胎成纤维细胞系,它具有明显的接触抑制作用,所以易于识别已发生转化的细胞。293细胞是人肾上皮细胞系,有多种...
用jetPRIME和Lipo3000
转染293T
细胞,哪个效果更好?
答:
事实上,对于
293
系的细胞系,最好用的是
PEI
这种东西。毒性小,
转染
效率高,一般对293系列的细胞系可以轻易达到80%。polyscience有粉末买,买回来后直接在分子纯度的水里配置成1ug/uL的溶液,和你的质粒按照1ug DNA/6ug PEI对293进行转染。而且直接使用自制的PEI非常便宜,在293上远比商品化的脂质体...
什么是
293T
细胞?
答:
293T
细胞是一种由293细胞衍生的人肾上皮细胞系,它特异表达SV40大T抗原,广泛应用于基因
转染
和病毒包装。作为贴壁细胞,293T对培养基的要求相对简单,通常使用高糖DMEM培养基,含有10%的胎牛血清。在冻存时,可以使用10% DMSO或完全培养基作为保存液。培养293T细胞时,需按照特定步骤进行:首先,轻轻...
293T
细胞
转染
答:
血清的存在会干扰siRNA与
转染
试剂的混合,从而影响转染效率。建议用来稀释siRNA和稀释转染试剂的培养基是无血清培养基。我们实验室前段刚用RFect,siRNA方法做完A549细胞,细胞的铺板密度在45%左右,用的24孔板,每孔2ul试剂,设置的siRNA终浓度10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度,每个梯度做了2个复孔,方便...
什么是
293T
细胞?
答:
293T
细胞是由293 细胞派生, 表达SV40 大T抗原的人肾上皮细胞系, 被广泛应用于瞬时
转染
以过表达各种目标蛋白, 或是用以包装病毒。 293T 为贴壁细胞, 这种细胞对培养基的营养成分要求并不高。培养条件为:完全培养基: 高糖 DMEM, 10% 胎牛血清; 冻存液: 胎牛血清或完全培养基, 10% DMSO。传代...
293t
是什么细胞?
答:
293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高,转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时
转染293T
细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞...
HEK-
293T
人体肾脏细胞系(STR鉴定)
答:
HEK-
293T
细胞是293T(
293t
sA1609neo)细胞系(ATCC CRL-11268)的衍生物。细胞持续表达SV40抗原,该细胞常用于
转染
实验,转染效率较高。(转染一般以50%密度铺板,待细胞刚刚贴到皿壁上后(一般8-10小时),即可进行转染操作)2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长 3) 含量:>1x106 个/mL 4) 污染...
293t
细胞
转染
后很多飘起来
答:
这个是
转染
试剂的问题,毒性略大造成的了细胞的死亡,不用无血清培养基,直接用不含双抗的完全培养基,或者试试RFECT sRNA Transfection Reagent 这个可以在转染后不更换培养基,对细胞的毒性较小
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