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质粒的筛选标记有哪些
利用
质粒
抗生素
筛选标记
进行转化子筛选的机理
答:
大多数质粒载体都是用抗菌素抗性标记
,包括氨苄青霉素抗性(Ampr)、卡那霉素抗性(Kanr)、四环素抗性(Tetr)、链霉素抗性(Strr)和氯霉素抗性(Cmlr))等。 i)氨苄青霉素(Ampicillin,Amp)是青霉素的衍生物,通过干扰细菌细胞壁合成的末端反应,杀死生长的细菌。细菌质粒Amp r基因编码b-内酰胺酶,特异地切割氨苄青霉素的b-内酰...
质粒的筛选标记有哪些
用途?
答:
(2)插入失活:通过插入失活进行筛选的质粒主要有pBR322
,该质粒具有四环素抗性基因(emphasis:role=italictetsuperscriptrsuperscriptemphasis)和氨苄青霉素抗性基因(emphasis:role=italicampsuperscriptrsuperscriptemphasis)两种抗性标记。当外源DNA片段插入emphasis:role=italictetsuperscriptrsuperscriptemphasis基...
质粒
载体图谱上面的英文分别代表什么?
答:
图谱中的AmpR、KanaR等表示质粒载体中的筛选标签
,多为抗生素抗性基因,方便后续通过抗生素筛选阳性克隆。特点是单词最后会以大写R或上标r结束。图谱中的MCS或者许多内切酶排排坐的部分,就是质粒的多克隆位点。多克隆位点为一系列限制性内切酶酶切位点,是外源DNA的插入位点,一般可通过酶切/连接的方式将外...
用什么可以
标记质粒
呢?
答:
青霉素抗性基因、四环素抗性基因.氨苄青霉素抗性基因等
,用到的主要是抗青霉素基因,因为受体细胞多为细菌,青霉素可将其杀死,故用抗青霉素基因做标记。但这也不一定,比如荧光蛋白就不用标记基因。懂否?
重组
质粒
dna转化大肠杆菌实验使用
的筛选标记
是什么
答:
重组质粒dna转化大肠杆菌实验使用的筛选标记如下。
1、用质粒编码的筛选标记。2、重组质粒DNA分子筛选标记
。
质粒的
选择
标记有哪些
基因?
答:
抗生素抗性基因是目前使用最广泛的选择
标记
。(1)氨苄青霉素抗性基因:氨苄青霉素抗性基因(Ampicillin:resistance:gene,emphasis:role=italicampsuperscriptrsuperscriptemphasis)是基因操作中使用最广泛的选择标记,绝大多数在大肠杆菌中克隆的
质粒
载体带有该基因。它基因编码一种酶,该酶可分泌进入细菌的周质...
质粒
图谱4大要素
答:
质粒
中有两个 origin 的,为穿梭质粒,既可以在原核细胞复制,也可在真核细胞中复制。二、
筛选标记
: 多为抗性基因,以便加以检测筛选;只存在单抗性的质粒多为原核克隆载体 和原核表达载体。而存在两种或以上的抗性的多为真核表达质粒,多为穿梭质粒 真核表达质粒不仅含 如AmpR ,还有如NeoR 筛选...
怎么通过
标记
基因挑选含有目的基因的
质粒
答:
如果是做基因克隆的话,可以直接用蓝(兰)白斑
筛选
。一般的克隆载体上有Lac Z基因,在IPTG和X-gal作用下能产生蓝斑,而此基因中间有多克隆位点,当你的片段基因插入时,把这个基因给破坏了,不能产生兰斑,而只是产生白斑。这样就区别开来,象PUC18/19,PBR322等最常用的
质粒
都有Lac Z基因。参考资料...
穿梭
质粒
为什么要两种选择
标记
答:
如果你构建的
质粒
是想在哺乳动物细胞中使用,而上面只有一个氨苄青霉素的抗性基因,那么你就只能在大肠杆菌中
筛选
出这个质粒,而没法检验该质粒是否正确地导入了哺乳动物细胞,因为抗生素对哺乳动物细胞无效。简言之,就是因为抗性选择筛选的方式不兼容,所以有两个选择
标记
。希望能够帮到你~望采纳~谢谢~
质粒
图谱怎么看
答:
MCS(Multiple Cloning Site,也就是多克隆位点),一般图中会把多克隆位点上的酶切位点都
标记
出来。上面的酶切位点顺序,一般都是按照5`-3`的顺序排列下来的,需要注意的是这样几点。第一点是要注意,酶切位点边
标注
了*的一般是指并不仅仅存在一个位点,也就不能用来作为构建
质粒的
酶切位点。第...
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