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植物基因组dna的提取
植物基因组DNA
怎样
提取
?
答:
1. 叶片剪碎,置于研钵中,加700�0�8l
DNA提取
液(65oC预热的2%CTAB),并迅速细致研磨;2. 再加入700�0�8l DNA提取液,同时研磨完全;3. 吸取研磨完全后的液体700�0�8L置于1.5ml 的eppendorf管中(即1.5ml 离心管)(可以直接进入...
植物基因组DNA提取
怎么做?
答:
eppendorf中加入1ml TE。用钩状玻璃棒捞出
DNA
絮团,在干净吸水纸上吸干,转入含TE的离心管中,DNA很快溶解于TE。7.如DNA不形成絮状沉淀,则可用5000rpm离心5分钟,再将沉淀移入TE管中。这样收集的沉淀,往往难溶解于TE,可在60℃水浴放置15分钟以上,以帮助溶解。8.将DNA溶液3000rpm离心5分钟,上清液倒入...
比较常规法和去多糖法
提取植物基因组dna的
区别
答:
2、提取效果不同:由于去多糖法可以更好地破坏植物细胞壁
,因此可以获得更高纯度的DNA,而比较常规法则通常需要进行多次提取和纯化,才能获得较高质量的DNA。3、操作难度不同:比较常规法相对简单易行,需要的试剂和设备较少。而去多糖法则需要一些特殊的试剂和设备,操作难度稍高。4、适用范围不同:比较...
植物基因组DNA提取
与其他生物基因组DNA提取有何主要的异同
答:
质粒DNA提取一般用沸水浴法和碱裂解法
,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用,它主要是将细胞内的环状质粒提取出来,一般需要用SDS裂解,RNA酶降解,然后过柱,再进行洗脱.过程比较简单.而基因组DNA提取则较为复杂,也需要用SDS裂解和RND酶降解,但降解时间较长,同时对有些革兰氏阳性细菌还要进行溶菌酶处理,...
植物基因组dna的提取
与鉴定(SDS法)实验过程中可造成DNA降解的可能原因...
答:
在
植物基因组DNA提取
与鉴定实验中,可能导致DNA降解的原因有以下几个:酶的活性:在裂解细胞的过程中,一些细胞内部的酶会被释放出来,这些酶具有核酸酶活性,能够分解DNA分子。高温:在实验过程中,如果植物样品在高温下裂解,可能会加速DNA的降解,从而影响
提取DNA的
质量。酸碱度:高或低的pH值会使DNA...
植物基因组DNA
可用植物根
提取
吗?具体步骤如何
答:
原理上是可以的,但是我们是不会用
植物
的根
提取DNA的
。这样很麻烦!首先是植物有细胞壁的,我们还要用纤维素酶果胶酶去除细胞壁,其次是细胞内的细胞器很多我们做实验的时候是要细胞核内的染色体的DNA,所以在书上所说的步骤中我们还要过滤掉杂质(各种细胞器,蛋白质)这也是我们为什么要用成熟的红细胞...
实验室一般如何定量
提取植物基因组DNA的
浓度
答:
1.
提取DNA
(1)提取DNA所用
的提取
液、吸头、离心管等需要在高压灭菌锅中121℃(约1.1 kg/cm2)高压灭菌20 min。(2)用液氮将50mg 幼嫩叶片研磨成细粉,置于1.5ml 离心管中加入预热至65℃的600μl 的CTAB提取液,轻摇混匀。(3)65℃水浴1小时,其间轻摇混匀。(4)12000rpm离心10min,...
简述CTAB法
提取植物基因组
总
DNA的
原理
答:
1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5 ml Eppendorf管中;(2)加入800 μl的CTAB
提取
缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000 r/min,离心15 min;(3)小心吸取上清液,加入等体积的酚:氯仿(各400μl)溶液,混匀,4℃,12000 r/min,离心10 min;...
...知道
提取的DNA
在哪一步丢失,而最终导致
DNA的提取
不成功?
答:
常规的
DNA提取
过程,一般分为三个阶段:A 将DNA从细胞核中抽提出来(要破坏细胞膜,如果是
基因组DNA
,那么还要破坏核膜) B 去杂质(主要是蛋白质、糖类和RNA,还有一些别的次级产物) C 纯化(用70%乙醇清洗多次,去除其它有机溶剂,然后干燥,再用无菌水溶解DNA)据我所知,目前还没有可以...
植物DNA提取
中怎样检测提取到DNA质量
答:
看有无断裂降解。影响DNA提取质量的因素:如果实验开始
植物
样品不经液氮处理,则提取液中的CTAB浓度需要提高到4%。在大多数情况下,使用0.1%巯基乙醇,并不能完全抑制叶片中的氧化作用。但这种氧化作用不会影响限制性内切酶的活性。如果使用的巯基乙醇浓度高于0.1%,则会大大降低
DNA提取的
得率。
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